名 称

HUVEC-GFP稳转株

品 牌

AG九游会生物

货 号

TW-CC3703

英 文

HUVEC-GFP细胞

规 格

1*10^6

冻 存

液氮冻存

干冰运输

2ml冻存管

活细胞运输

T25瓶

培养基

冻存液基础培养基 +20%FBS+10%DMSO

存接收后处理

干冰运输，收到细胞后立即转入 -80℃冰箱短暂中转或直接复苏

收到细胞后，发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落 ,请立即拍照与AG九游会联系

发货方式

复苏发货（免运输费用） / 冻存发货（需加干冰运输费用）

供应范围

仅限于科研实验使用，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用

特别说明

细胞购买 /细胞培养/动物血清/实验服务/原代提取/菌株购买，请立即与 AG九游会 生物联系

复苏接收后处理

收到细胞后，请首先检查培养瓶是否破损或漏液，培养液是否混浊

如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给AG九游会

75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后，在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片

若有贴壁细胞脱落，可收集上清离心，将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。

建议收到当天不要消化处理，如果细胞长满 90%，可选择传代处理

您收到细胞 3天内没有反馈相关问题，出现的细胞问题将不提供免费重发服务

1 、细胞传代：细胞密度达到 80-90%时即可传代

① 弃去培养上清，用 PBS或生理盐水清洗1-2次。

② 加入 2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化。

③ 1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止。

④ 将细胞悬液 1000RPM左右条件下离心4min，弃上清。

⑤ 用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中， T25培养瓶加6-8ml培养基。

⑥ 悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏

① 将冻存管在 37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。

② 在 1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。

3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

① 弃去培养上清，用 PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）。

②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化。

③ 将细胞悬液 1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞。

④ 将冻存管放入程序降温盒，放入 -80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

细胞予
重发

1. 细胞运输中遭遇的各种问题，细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等， 重发。

2. 收到细胞未开封，如出现污染状况， 重发 。

3. 收到细胞 3天内，发现污染问题，经核实后， 重发 。

4 .常温发货的细胞静置2小时后，干冰冻存发货细胞复苏2天后，绝大多数细胞未存活，经核实后， 重发 。

5. 常温发货的细胞静置 22小时并且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后，出现污染，经核实后， 重发 。

6. 细胞活性问题，请在收到产品 3天内给AG九游会提出真实的实验结果，用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，经核实后， 重发 。

细胞不予
重发

1. 客户操作造成细胞污染， 不重发 。

2. 客户严重操作失误致细胞状态不好， 不重发 。

3 .非AG九游会推荐细胞培养体系致的细胞状态不好， 不重发 。

4. 细胞状态不好，未提供真实清晰的培养前 3天的细胞状态照片， 不重发 。

5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的， 不重发 。

6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于 3天的， 不重发 。

特别说明

上海AG九游会生物客户在细胞培养过程中 ,有任何技术问题可以拨打免费服务电话 : 021-54845833 ,AG九游会随时给予实验中的免费解答。